PL09 Mecanismos celulares y moleculares de la actividad antiinflamatoria, inmunoreguladora y antitumoral de Uncaria tomentosa. III Congreso Iberoamericano de Fitoterapia: tradición, ciencia y cooperación. Revista de Fitoterapia 2012; 1

PL09 mecanismos celulares y moleculares de la actividad antiinflamatoria, inmunoreguladora y anti-tumoral de Uncaria tomentosa José L. Aguilar, Percy Rojas, Iván Lozada, Adolfo Marcelo, Richard Dreyfuss, Patricia Hurtado, Yubell Alvarez, Claudia Ocampo, Fidel Barantes Sección Inmunología, Departamento de Ciencias Celulares y Moleculares, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia. Box 4314. Lima 100. PERÚ. E-mail: jose.aguilar@upch.pe. Las propiedades mejor estudiadas de Uncaria tomentosa (Uña de Gato, UG) son su actividad anti-inflamatoria, su actividad in- muno-moduladora y su efecto anti-tumoral. Nuestro grupo utilizamos un extracto estandarizado de Uncaria tomentosa Willd DC enriquecido al 5 % en su contenido de alcaloides oxindólicos totales, detectados y cuantificados por HPLC. Evaluamos su nivel de toxicidad potencial aguda a través del DL50, así como su potencial actividad inductora de apoptosis evaluada en cultivos celulares mediante la técnica de Anexina-V por citometría de flujo en macrófagos humanos estimulados o no con LPS y por coloración de naranja de acridina. Evaluamos su actividad anti-inflamatoria in-vivo usando ratones Balb/C, bajo el modelo del edema de la pata inducido por λ-Carragenina y se midió el porcentaje de inhibición de la inflamación. Para conocer los mecanismos moleculares de inmuno-regulación se utilizó un modelo experimental de la bolsa de aire en ratones (Air-pouch) para evaluar la capacidad del ex- tracto para modificar la producción de TNFα (citoquina pro-inflamatoria) e IL-10 (citoquina anti-inflamatoria) y utilizando citometría de flujo se evaluó la expresión de la molécula de adhesión ICAM-1 en macrófagos humanos estimulados o no con LPS. El extracto fue además evaluado en un estudio clínico fase I por su tolerancia y seguridad, y en un estudio fase II, donde se evaluó su actividad anti-inflamatoria medida clínicamente mediante evaluación del dolor utilizando la escala visual análoga (EVA) en reposo, actividad, durante el día y la noche, evaluación del estado funcional y de la apreciación general del médico y del paciente, en un esquema de 6 semanas de tratamiento a 300mg diarios del extracto por vía oral. Actualmente estamos desarrollando un estudio doble ciego, ramdomizado, placebo-controlado en pacientes con Artritis Reumatoi- dea moderadamente severa, que reciben 300mg diarios del extracto de UG o placebo, midiéndoles evolución clínica, citoquinas pro y anti-inflamatorias, y actividad sobre las sub-poblaciones de células dendríticas (DC) y su expresión de moléculas de maduración y activación. La actividad anti-tumoral se evaluó en un modelo in-vivo en ratas Wistar induciéndoles experimentalmente cáncer con células de Walker-256, midiendo crecimiento y peso tumoral y su actividad sobre enzimas pro-oxidativas y anti-oxidantes en tejido tumoral y tejido hepático en ratas tratadas con diferentes concentraciones del extracto de UG. Además hemos evaluando la actividad anti-tumoral en otro modelo con melanoma maligno en ratones C57BL/6, usando células de melanoma B16, midiéndose crecimiento tumoral, sub-poblaciones y activación de linfocitos T CD4+, CD8+ y DC. Los resultados mostraron que el extracto tiene muy baja toxicidad con DL50 de 14,262 mg/Kg de peso corporal, mientras, tanto el ensayo de Anexina-V como de naranja de acridina mostraron ausencia de inducción de apoptosis en macrófagos estimulados o no con LPS. Se demostró actividad anti-inflamatoria en el modelo de la inflamación de la pata inducida por λ-Carragenina, siendo más activo el extracto hidro-alcohólico comparado al extracto acuoso. En los mecanismos moleculares de actividad, se evidenció importante actividad inhibitoria de la producción de TNFα, mientras producía incremento en la producción de IL-10 en el modelo de Air-pouch. Se demostró una importante actividad de inhibición de la expresión de ICAM-1 en macrófagos estimulados con LPS. En el ensayo clínico fase I se evaluaron 52 sujetos adultos sanos de ambos sexos, quienes mostraron buena tolerancia al extracto y no se en- contraron efectos tóxicos clínicos ni en la bioquímica sanguínea general. En el ensayo clínico abierto fase II se evaluó 24 pacientes con padecimientos dolorosos articulares agudos y se encontró una demostrable actividad anti-inflamatoria desde las 3 semanas de uso del extracto y ausencia de efectos colaterales. Los experimentos con inducción tumoral en el modelo de ratas Wistar con tumor de Walker-256, se mostró una disminución del tamaño y volumen tumoral y efecto inductor de enzimas pro-oxidativas en el tejido tumoral, mientras activación de enzimas anti-oxidantes en tejido hepático, mostrándose una clara actividad anti-oxidante del extracto de UG. Estos estudios demuestran la seguridad y eficacia anti-inflamatoria, inmunoreguladora y anti-tumoral del extracto de UG en modelos in-vitro e in-vivo en animales de experimentación y planteando además su mecanismo de acción a través de una sumación de acciones intercelulares y moleculares, dando soporte para continuar con estudios en humanos.